尊龙凯时专注于提供细胞体外基因敲除解决方案，致力于为客户提供定制化的细胞基因敲除服务。目前，我们已经推出以下几种细分的敲除服务，欢迎咨询尊龙凯时团队，以获取技术路线和成功案例的详细资料。

定制化基因敲除服务

尊龙凯时提供的真核细胞体外基因敲除定制服务，将定期更新Q&A，以便更好地为我们的客户提供服务。

Q&A【2503版】

前1-20问，关于基因敲除定制服务相关问题，请详细了解：

• 21. 如何验证基因敲除是否成功？
• 22. 精准敲除与模糊敲除有何区别？

精准敲除与模糊敲除的区别

精准敲除是通过同源重组（HDR，Homology-Directed Repair）机制，在目标基因中引入精确的修饰（例如特定片段删除、点突变或插入），从而实现完全或部分失活基因功能。通常所说的基因敲除多指模糊敲除，尊龙凯时提供精准敲除定制服务，依据靶基因的特定区域，进行准确的核苷酸序列敲除、敲入及突变处理。

模糊敲除则是通过非同源末端连接（NHEJ，Non-Homologous End Joining）机制，随机在目标基因的特定区域引入插入或缺失（Indel）突变，导致基因编码框移位或提前终止密码子，从而破坏基因功能。

其他常见问题

• 23. CRISPR/Cas9方法可以敲除的最大片段范围是多少？
• 24. 如何提高原代细胞的编辑效率？
• 25. 如何提高基因敲除效率？
• 26. 如何分析基因敲除后的表型变化？
• 27. 如何区分纯合敲除与杂合敲除？
• 28. CRISPR RNP法适用的细胞及应用场景有哪些？

结论

尊龙凯时的CRISPR/Cas9 RNP基因编辑法通过将多条经过化学合成或生物合成的single-guide RNA（sgRNA）与Cas9蛋白以体外混合的方式，形成核糖核蛋白复合物（Ribonucleoprotein, RNP）。通过电转化或脂质体转染的方式，将RNP有效递送到细胞内，实现高效、稳定的遗传性细胞池构建。该方法避免了传统慢病毒或质粒法的复杂性，使基因组编辑后72小时内不再引入外源序列，显著降低了脱靶效应，并减少了细胞基因组的不稳定性和高脱靶风险。

尊龙凯时的CRISPR/Cas9 RNP法正在逐步替代传统方法，在基因敲除细胞系构建领域展现出强大的潜力。